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发布时间:2023-11-16 07:24:43

一:关于柱子的尺寸应该是粗长的最好。柱子长了,相应的塔板数就高。柱子粗了,上样后样品的原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄)这样相对的减小了分离的难度。如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分rf0.20.4,杂质相差0.1以上),就可以少用硅胶,用小柱子(例如200毫克的样品,用2cm×20cm的柱子);如果相差不到0.1,就要加大柱子,我觉得可以增加柱子的直径,比如用3cm的,也可以减小淋洗剂的极性等等。二、淋洗剂的选择:在我进行过柱子之前,我们要进行点板进行分析。我们通过调节展开剂的极性,即以不同比例的乙酸乙酯和正己烷的体积比进行混合,使我们要的产物点的所需组分rf0.20.4,杂质相差0.1以上,这是我们就可以进行过柱子了。过柱子的淋洗剂的极性要比展开剂的极性小一倍以上,在过柱子的过程中可以根据需要加大极性。三:关于操作问题1装柱,柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的。干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行。装完的柱子应该要适度的紧密(太密了淋洗剂走的太慢),一定要均匀(不然样品就会从一侧斜着下来)书中写的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就全下来了。当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了。但是柱子更忌讳的是开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废!2样品的收集,收集的试管大小要以样品量而定,特别是小量样品,可以用试管进
行收集,中量的样品,我们可以用小的锥形瓶来收集。通过点板跟踪确定各个组分的物质,然后把相同成分的试管的淋洗液进行集中。爬大板也可以介绍一下。

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